A.I. Polinova, D.R. Zagirova, L.Yu. Kokaeva, I.I. Busko, I. V. Levantsevich, S.N. Elansky
Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae cyflwr ffytoiechydol stociau tatws a hadau wedi dirywio'n amlwg ym Melarus. Mae rôl rhai mathau o organebau niweidiol a'u cymhareb mewn agrophytocenoses wedi newid. Mae niweidioldeb llawer o afiechydon eang nid yn unig (malltod hwyr, alternariosis, pob math o glafr, bacteriosis, pydredd fusarium sych) wedi cynyddu, ond hefyd rhai newydd, heb eu hastudio'n ddigonol, fel pydredd dyfrllyd clwyf (Ffig. 1). Nodwyd y clefyd hwn, sy'n digwydd yn India, Canol Asia a gwledydd deheuol eraill, yn rhanbarthau Gomel, Brest, Grodno a Minsk yn Belarus. Yn yr un modd ag oomycetes eraill sy'n byw mewn pridd, mae P. ar y mwyaf yn achosi difrod enfawr mewn amodau lleithder gormodol - mewn ardaloedd sydd wedi'u draenio'n wael, yn ystod glawogydd hirfaith (Taylor et al., 2008).
Ym Melarus, gwelwyd lledaeniad y clefyd mewn blynyddoedd gyda thymheredd uwch yn y tymor tyfu: mewn rhai sypiau o datws, effeithiwyd ar 8-10% o gloron. Gall pydredd dyfrllyd clwyfedig cloron achosi difrod sylweddol, sy'n cael ei achosi gan ddiffyg mathau gwrthsefyll, mesurau amddiffyn datblygedig a datblygiad cyflym y clefyd pan fydd y cloron yn cael eu heffeithio (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). Mae'r afiechyd yn effeithio ar gloron yn unig. Yn Rwsia, nid yw pydredd dyfrllyd clwyf yn arwyddocaol eto.
Yn y gwaith hwn, gwnaethom ymchwilio i 4 math o gyfryngau achosol pydredd dyfrllyd clwyf wedi'u hynysu oddi wrth gloron tatws yr effeithiwyd arnynt o fathau Vektar Belorussian, Skarb a hybridau bridio yn storfeydd Canolfan Wyddonol ac Ymarferol Academi Wyddorau Genedlaethol Belarus ar gyfer Tatws a Garddwriaeth (rhanbarth Minsk). Amcanion yr astudiaeth oedd canfod rhywogaethau sy'n perthyn i'r ynysoedd ynysig, eu ffyrnigrwydd mewn perthynas â chloron tatws, i asesu'r twf ar wahanol dymereddau amgylchynol a'u gallu i wrthsefyll metalaxyl.
Tyfwyd myceliwm yr ynysoedd ar gyfrwng pys hylif (cafodd 180 g o bys gwyrdd wedi'i rewi ei ferwi am 10 munud mewn 1 litr o ddŵr distyll, ac ar ôl hynny cawsant eu hawtoclafio ar 30 atm am 1 munud); Roedd DNA wedi'i ynysu oddi wrth bob straen. I ynysu DNA, cafodd myceliwm wedi'i rewi ei drofannu mewn nitrogen hylifol, ei orchuddio mewn byffer CTAB, ac yna ei amddifadu â chlorofform. Roedd y DNA yn cael ei storio mewn dŵr wedi'i ddad-ddyneiddio ar -20 ° С. Dangosodd dadansoddiad o ddilyniannau niwcleotid rhanbarthau genom rhywogaeth-benodol (rhanbarthau o enynnau ribosomaidd niwclear 18S a 5,8S, yn ogystal â'r spacer intergenig trawsgrifiedig ITS1) wedi'i chwyddo gan ddefnyddio primers ITS1 ac ITS2 (White, 1990), bod y straen a astudiwyd yn perthyn i'r rhywogaethau Pythium ultow Trow. (cyfystyr Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo & Kakish).
Effeithiodd yr holl straenau a astudiwyd ar dafelli o gloron tatws Gala a roddwyd mewn siambrau llaith. Ffurfiwyd smotiau tywyll arnynt, gan droi yn ddiweddarach yn friwiau llaith, treiddgar iawn (Ffig. 2). Gwnaed yr haint trwy roi'r myceliwm P. eithaf yng nghanol sleisen y cloron.
Deorwyd y disgiau cloron wedi'u brechu ar + 22 ° C. Nodwyd cyfradd twf uchaf yr ardal yr effeithiwyd arni yn ystod y 2 ddiwrnod cyntaf, yna ni newidiodd ardal yr wlser yn ymarferol.
Roedd y patrwm hwn yn ddilys ar gyfer pob math a astudiwyd.
Amcangyfrifwyd cyfradd twf y straen ar gyfrwng agar ceirch ar dymheredd o 5, 15, 24, a 34 ° C (Ffig. 3). Gwelwyd twf ar bob tymheredd; nodwyd y gyfradd twf uchaf ar 24 ° C (roedd y cwpan 86 mm wedi gordyfu'n llwyr mewn 2 ddiwrnod). Ar 15 a 34 ° C, roedd y gyfradd twf yn sylweddol is (roedd y cwpan wedi gordyfu mewn 4 a 3 diwrnod, yn y drefn honno).
Ar dymheredd o 15, 24, a 34 ° C, nid oedd cyfraddau twf yr holl straenau a astudiwyd yn wahanol. Ar dymheredd o 5 ° C, tyfodd straen P1 yn gynt o lawer nag eraill (20 mm ar ddiwrnod 4), P4 - ychydig yn arafach (10 mm ar ddiwrnod 4), yn ymarferol ni thyfodd P2 a P3.
Dylid nodi hefyd, ar dymheredd o 24 ° C, bod tyfiant wedi cychwyn yn syth ar ôl plannu ar ddysgl, ar dymheredd o 15 a 34 ° C, gohiriwyd dyfiant gweithredol o 1 diwrnod, ac ar 5 ° C - erbyn 2 ddiwrnod.
Cydnabyddir metalaxyl (a'i isomer mefenoxam) fel y cyffuriau mwyaf effeithiol ar gyfer rheoli oomycetes pridd. Mae Metalaxil yn gallu treiddio cloron a darparu (hyd yn oed ar grynodiadau isel iawn) eu diogelwch tymor hir (Taylor et al., 2008, Bruin et al., 1982). Fodd bynnag, mae effeithiolrwydd metalaxyl yn gostwng yn sydyn ar ôl ymddangosiad straen gwrthsefyll mewn poblogaethau. Cafwyd hyd i straen uchel ei wrthwynebiad mewn sawl rhanbarth yn yr Unol Daleithiau (Taylor et al., 2002). Nid oes unrhyw ddata ar wrthwynebiad y straenau eithaf Belarwsiaidd P. i fetalaxyl, ac felly penderfynwyd profi eu gwrthiant i'r cyffur yn y gwaith hwn.
Cynhaliwyd yr astudiaeth o dueddiad i'r metalaxyl ffwngladdiad ar gyfrwng agar ceirch gan ychwanegu ffwngladdiad mewn gwahanol grynodiadau (Pobedinskaya ac Elansky, 2014).
Roedd gan y straenau a astudiwyd rai gwahaniaethau mewn ymwrthedd i fetalaxyl (Tabl 1). Felly, mewn crynodiad ffwngladdiad o 1 mg / L, stopiodd tyfiant y straen P4 yn llwyr, ac arafu gweddill y straen yn fawr. Tyfodd straenau P1 a P2 yn araf iawn ar gyfrwng gyda chrynodiad metalaxyl o 10 mg / L. Roedd y crynodiad effeithiol a gyfrifwyd o EC50 (crynodiad y ffwngladdiad sy'n arafu cyfradd twf y straen 2 gwaith o'i gymharu â'r rheolaeth) ar gyfer pob straen yn llai nag 1 mg / L. Felly, roedd pob straen yr ymchwiliwyd iddo yn agored i metalaxyl; dangoswyd ei fod yn hynod effeithiol wrth atal twf P. eithaf.
Yn ôl Bruin et al. (1982) ar ôl trin planhigion yn ystod llystyfiant â metalaxyl ar ddogn o 0,5 kg / ha, cronni ffwngladdiad mewn cloron oedd 0,055 μg / g yn y periderm, 0,022 μg / g yn yr haen cortical, a 0,034 μg / g yn rhan ganolog y cloron. Yn ôl ein data, mae'r crynodiad hwn o metalaxyl yn annigonol i wrthweithio'r afiechyd, ond gall arafu ei ddatblygiad.
Wrth dyfu ar gyfrwng ceirch, roedd pob straen yn ffurfio hosborau mewn monoculture (Ffig. 4), sy'n nodweddiadol ar gyfer P. eithaf. Ni ddangosodd splicing pâr o'r straen unrhyw symptomau gweladwy o anghydnawsedd llystyfol - roedd y cwpanau wedi'u gorchuddio'n gyfartal â myceliwm.
Mae'r data a gafwyd yn dangos bod P. ultimum yn ffytopathogen sy'n gallu tyfu'n gyflym mewn ystod tymheredd eang, gan gynnwys ar dymheredd storio o 5 ° C. Mae'n ffyrnig i feinweoedd cloron tatws ac yn ffurfio hosbores sy'n gallu goroesi yn y tymor hir. Felly, mae'r rhywogaeth yn ffytopathogen peryglus a all fod yn fygythiad i amaethyddiaeth ac mae angen ei astudio yn ychwanegol.
Gwnaed yr ymchwil gyda chefnogaeth Sefydliad Gwyddoniaeth Rwsia (prosiect N 14-50-00029).
Tabl 1. Sensitifrwydd y straenau eithaf P. i metalaxyl
Straen | Crynodiad metalaxyl, mg / l | ||
0 (rheolaeth) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Tua. Rhoddir y data cyfartalog ar gyfer 3 mesuriad.
Cyhoeddwyd yr erthygl yn y cyfnodolyn "Potato Protection" (Rhif 1, 2017)