D. Yu Ryazantsev, E. M. Chudinova, L. Yu. Kokaeva, S. N. Elansky, P. N. Balabko, G. L. Belova, S. K. Zavriev
Mae'r ffwng ffytopathogenig Colletotrichum coccodes yn achosi afiechydon peryglus mewn tatws a thomatos o'r enw anthracnose a smotyn du cloron. Yn ôl nodweddion morffolegol, maent yn aml yn anodd gwahaniaethu oddi wrth afiechydon a achosir gan ficro-organebau eraill; ar ffrwythau tomato gwyrdd, gall y clefyd fod yn anghymesur, gan amlygu ei hun ar ffrwythau coch aeddfed yn unig. Ar gyfer diagnosis cyflym a chywir o'r pathogen, cynigir system prawf PCR amser real. Er mwyn datblygu system brawf, penderfynwyd dilyniant niwcleotid y genyn glyserol triphosphate dehydrogenase o 45 C. straen coccodau sydd wedi'u hynysu oddi wrth gloron tatws mewn gwahanol ranbarthau yn Rwsia.
Yn seiliedig ar y canlyniadau a gafwyd a dadansoddiad o ddilyniannau tebyg o rywogaethau eraill sydd ar gael yng nghronfa ddata GenBank, dyluniwyd primers penodol i rywogaethau a stiliwr ar gyfer C. coccodau. Er mwyn gwirio penodoldeb y system brawf a grëwyd, cynhaliwyd PCR gyda DNA wedi'i ynysu o ddiwylliannau pur 15 o wahanol rywogaethau o ffyngau parasitig a saprotroffig sy'n gysylltiedig â phlanhigion tomato a thatws (Fusarium oxysporum, F. verticillium, Phomopsis phasoli, Alternaria alternata, Helminthosporium solani, Colletotrichum coccodes Phellinus ferrugineovelutinus, Stemphylium vesicarium, Helminthosporium solani, Phomopsis phasoli, Neonectria radicicola, Rhizoctonia solani, Penicillium sp., Cladosporium fulvum, C. cladosporioides). Penderfynwyd ar bresenoldeb DNA coccodes Colletotrichum ar gylchred trothwy o 20–27, tra canfuwyd rhywogaethau eraill ar ôl 40 cylch neu ni chawsant eu canfod. Mae'r system brawf yn ei gwneud hi'n bosibl canfod crynodiadau DNA C. coccodau sy'n fwy na 0.01 ng / mm3 yn y gymysgedd PCR a ddadansoddwyd. Gan ddefnyddio'r system brawf ddatblygedig, ymchwiliwyd i bresenoldeb C. coccodau mewn dail tomato gyda symptomau afiechydon ffwngaidd ac mewn cloron tatws heb symptomau allanol y clefyd. Casglwyd dail â symptomau haint ffwngaidd o ddau gae gwahanol yn Nhiriogaeth Krasnodar, cloron - o gaeau yn rhanbarthau Kostroma, Moscow, Kaluga, Nizhny Novgorod. Cafwyd hyd i un ddeilen tomato yn cynnwys C. coccodes DNA yn Nhiriogaeth Krasnodar; canfuwyd presenoldeb sylweddol o DNA o'r pathogen hwn mewn 5 sampl o gloron a dyfwyd yn rhanbarthau Kostroma, Moscow, Kaluga.
Cyflwyniad
Mae ffyngau o'r genws Colletotrichum yn ffytopathogenau peryglus sy'n effeithio ar rawnfwydydd, llysiau, perlysiau, ffrwythau lluosflwydd a phlanhigion aeron. Un o rywogaethau hollbresennol y genws hwn, Colletotrichum coccodes (Wallr).
Hughes, yw asiant achosol anthracnose a smotyn du tatws a thomatos, ac mae'n achosi afiechydon nifer o blanhigion eraill o'r teulu Solanaceae, gan gynnwys chwyn (Dillard, 1992). Mae C. coccodes yn heintio holl rannau tanddaearol y planhigyn, seiliau coesyn, dail a ffrwythau (Andrivon et al., 1998; Johnson, 1994). Ar groen cloron tatws heintiedig, gwelir datblygiad smotiau llwyd gydag ymylon amlwg yn amlwg, lle mae dotiau du o sbororiad a microsglerotia i'w gweld yn glir. Yn ystod y storfa, gall wlserau sydd â chynnwys meddal eu ffurfio ym mwydion y cloron, h.y. mae'r afiechyd yn mynd i mewn i'r cyfnod anthracnose, sydd, fodd bynnag, yn brin iawn.
Ar yr un pryd, mae symptomau anthracnose (wlserau croen gyda dotiau du bach) yn nodweddiadol o ffrwythau tomato. Ar ddail, mae symptomau C. coccodau yn ymddangos fel smotiau brown tywyll, fel arfer wedi'u ffinio â meinwe melyn (Johnson, 1994).
Mae datblygiad smotyn du ar y cloron yn difetha eu hymddangosiad, sy'n arbennig o amlwg wrth werthu tatws croen coch wedi'u golchi. Mae alltudio croen yn arwain at anweddiad gormodol a mwy o golledion storio (Hunger, McIntyre, 1979). Mae niwed i organau planhigion eraill yn arwain at golledion cynnyrch, a nodwyd mewn tir agored a chaeedig (Johnson, 1994; Tsror et al., 1999). Mae afiechydon a achosir gan C. coccodes yn gyffredin ym mron pob rhanbarth sy'n cynhyrchu tatws yn y byd, gan gynnwys Rwsia (Leesa, Hilton, 2003; Belov et al, 2018). Mae'n anodd rheoli'r afiechydon hyn oherwydd effeithiolrwydd annigonol ffwngladdiadau presennol yn erbyn C. coccodau a diffyg mathau gwrthsefyll (Read, Hide, 1995).
Gall inocwlws C. coccodes barhau mewn cloron hadau (Read, Hide, 1988; Johnson et al., 1997), mae hadau tomato (Ben-Daniel et al., 2010), wedi goroesi am amser hir mewn pridd, ar falurion planhigion (Dillard, 1990 ; Dillard, Cobb, 1993) ac mewn chwyn (Raid, Pennypacker, 1987). Mae gweithiau nifer o awduron (Read, Hide, 1988; Barkdoll, Davis, 1992; Johnson et al., 1997; Dillard, Cobb, 1993) wedi dangos bod datblygiad y clefyd mewn tatws a thomatos yn dibynnu i raddau helaeth ar bresenoldeb inocwl mewn hadau a pridd. Felly, er mwyn lleihau colledion o'r afiechyd, mae angen canfod (gan gynnwys meintiol) lluosogi y ffwng yn y deunydd hadau, yn y pridd, yn y cloron tatws hadau a'r hadau tomato a osodir i'w storio. Dim ond trwy bresenoldeb microsclerotia y gellir gwneud diagnosteg morffolegol mewn pridd a deunydd planhigion, ond maent hefyd i'w cael mewn mathau eraill o ffyngau.
Mae'r symptomau ar y cloron yn debyg iawn i'r clafr arian a achosir gan y ffwng Helminthosporium solani. Mae ynysu coccodau Colletotrichum a Helminthosporium solani i ddiwylliant pur braidd yn anodd ac mae'n cymryd amser hir oherwydd y tyfiant araf ar gyfrwng maethol. Er mwyn adnabod coccodau Colletotrichum yn gyflym, mae angen defnyddio dulliau diagnostig offerynnol. Y dull mwyaf cyfleus yw adwaith cadwyn polymeras (PCR) a'i addasu - PCR amser real. Ar hyn o bryd, defnyddir system brawf a ddatblygwyd gan ymchwilwyr o Brydain (Cullen et al., 2002) ar gyfer rhanbarth ITS1 o rDNA yn Ewrop a'r Unol Daleithiau. Mae ei ddefnydd wedi dangos canlyniadau da yn y dadansoddiad o ynysoedd Rwsia (Belov et al, 2018). Fodd bynnag, mae C. coccodes yn amrywiol iawn a gall ei ganfod o un dilyniant DNA arwain at ganlyniadau negyddol ffug. I gael diagnosis mwy dibynadwy, mae angen dadansoddiad ar gyfer sawl dilyniant DNA rhywogaeth-benodol, yr ydym wedi datblygu system brawf wreiddiol mewn cysylltiad â hwy sy'n caniatáu adnabod C. coccodau yn ôl dilyniant y genyn dehydrogenase glyceraldehyde-3-ffosffad.
Deunyddiau a dulliau
Er mwyn asesu effeithiolrwydd a phenodoldeb y systemau prawf a grëwyd, gwnaethom ddefnyddio diwylliannau pur 15 rhywogaeth o ffyngau, wedi'u hynysu gan yr awduron o'r samplau o ddail a ffrwythau tomato, cloron tatws yr effeithiwyd arnynt (Tabl 1). Er mwyn ynysu, cymerwyd organau planhigion â symptomau haint ffwngaidd, dim mwy nag un organ i bob llwyn.
Gosodwyd tafell o gloron gyda chroen, tafell o ffrwyth tomato, a deilen yr effeithiwyd arni o dan ficrosgop binocwlar, ac ar ôl hynny trosglwyddwyd myceliwm, sborau, neu ddarn o feinwe i gyfrwng agar (wort agar) mewn dysgl Petri gyda nodwydd dyrannu miniog. Roedd yr ynysoedd yn cael eu storio ar gogwydd agar mewn tiwbiau prawf ar 4 ° C.
Rhoddwyd samplau o ddail tomato â symptomau afiechydon ffwngaidd, y bwriedir eu dadansoddi, yn syth ar ôl eu casglu (yn y maes) mewn alcohol ethyl 70% lle cawsant eu storio nes eu bod yn ynysu DNA. Dosbarthwyd cloron tatws i'r labordy, eu plicio (darn 2 × 1 cm) ohonynt, a'u rhewi ar –20 ° С. Wedi'i storio wedi'i rewi nes ynysu DNA.
Tyfwyd diwylliannau pur ffyngau ar gyfer ynysu DNA mewn cyfrwng pys hylif. Tynnwyd myceliwm y ffwng o'r cyfrwng hylif, ei sychu ar bapur hidlo, ei rewi mewn nitrogen hylif, ei homogeneiddio, ei ddeor mewn byffer CTAB, ei buro â chlorofform, ei waddodi â chymysgedd o isopropanol ac asetad potasiwm 0.5 M, a'i olchi ddwywaith ag 2% o alcohol. Diddymwyd y DNA o ganlyniad mewn dŵr wedi'i ddad-ddyneiddio a'i storio ar dymheredd o -70 ° – (Kutuzova et al., 20). Mesurwyd crynodiad DNA gan ddefnyddio pecyn meintioli DNA HS ar gyfer DNA â haen ddwbl ar Qubit 2017 (Qiagen, yr Almaen). Cafodd y samplau alcohol ac wedi'u rhewi eu trofannu mewn nitrogen hylifol, yna gwnaed echdynnu DNA fel y disgrifir uchod (ar gyfer myceliwm diwylliannau ffwngaidd pur).
Tabl 1. Tarddiad y mathau o ffyngau a ddefnyddir
Enw madarch | Planhigyn, organ | Man dewis |
---|---|---|
Coccodau colletotrichum 1, C. coccodau 2, C. coccodau 3, Ilyonectria crassa, Rhizoctonia solani | cloron tatws | Rhanbarth Kostroma, cloron tatws cenhedlaeth gyntaf y cae, cyltifar Red Scarlett |
Coccodau colletotrichum 4 | deilen tatws | Cynrychiolydd. Mari El, Yoshkar-Ola |
Helminthosporium solani | cloron tatws | Rhanbarth Magadan, pos. Pabell, cloron tatws |
Cladosporium fulvum | deilen tomato | Rhanbarth Moscow, tomato ffrwytho mawr |
tomatoffilia arall | ffrwythau tomato | a gyflwynwyd gan staff labordy mycoleg a ffytopatholeg Sefydliad Ymchwil Holl Rwsia ar Ddiogelu Planhigion |
Fusarium verticillium, Phomopsisphaseoli, Alternaria alternata, Phellinus ferrugineovelutinus, Stemphylium vesicarium, Cladosporium cladosporioides, Acrodontium luzulae, Penicillium sp. | ffrwythau tomato | Tiriogaeth Krasnodar, ardal Krymsky, hufen Hufen |
Fusarium oxysporum. | gwraidd gwenith | Rhanbarth Moscow |
Perfformiwyd PCR ar fwyhadur DTprime (DNA-Technology). Ar gyfer PCR, defnyddiwyd primers gwreiddiol a stiliwr ar gyfer rhanbarth rhywogaeth-benodol y genyn glyserol triphosphate dehydrogenase: primer ymlaen Coc70gdf –TCATGATATCATTTCTCTCACGGCA, primer gwrthdroi Coc280gdr - TACTTGAGCATGTAGGCCTGGGT1. Mae'r primers yn ymhelaethu ar ranbarth 213 bp.
Cymerodd yr adwaith 50 ng o gyfanswm y DNA (wrth ddadansoddi dail a chloron) a 10 ng (wrth ddadansoddi DNA o ddiwylliannau ffwngaidd pur). Cafodd y gymysgedd adwaith (35 μl) ei wahanu gan haen paraffin yn ddwy ran: roedd yr un isaf (20 μl) yn cynnwys 2 μl o byffer adweithio 10 × (Tris-HCl 750 mM, pH 8.8; 200 mM (NH4) 2SO4; 25 mM MgCl2; 0.1% Tween- 20), 0.5 mM o bob triphosphate deoxynucleotide, 7 pmol o bob primer, a 4 pmol o stiliwr fflwroleuol hydrolyzable; roedd yr un uchaf yn cynnwys 1 μl o byffer 10 × PCR ac 1 U o Taq polymeras.
Mae gwahanu'r gymysgedd â pharaffin yn caniatáu i'r tiwbiau gael eu storio am amser hir ar dymheredd o 5 ° C ac i ddarparu cychwyn poeth o PCR ar ôl eu cynhesu am 10 munud ar dymheredd uwch na 80 ° C. Perfformiwyd PCR yn unol â'r rhaglen ganlynol: 94.0 ° C - 90 s (1 cylch); 94.0 ° C - 30 s; 64.0 ° C - 15 s (5 cylch); 94.0 ° C - 10 s; 64.0 ° C - 15 s (45 cylch); 10.0 ° C - storio.
Canlyniadau a thrafodaeth
Penderfynwyd ar ddilyniannau'r genyn dehydrogenase glyserol triphosphate mewn 45 straen sydd wedi'u hynysu oddi wrth ddail, coesau, cloron tatws, a ffrwythau tomato (Kutuzova, 2018) mewn gwahanol ranbarthau yn Rwsia. Rhannwyd y dilyniannau a astudiwyd o bob math yn 2 grŵp yn wahanol mewn dau niwcleotid. Mae dilyniannau niwcleotid cynrychiolwyr y ddau grŵp o dan y rhifau KY496634 a KY496635 wedi'u hadneuo yn GenBank.
Gwiriwyd y primers coc70gdf, coc280gdr a'r stiliwr cocgdz a ddyluniwyd ar eu sail gan ddefnyddio'r rhaglen BLAST (www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) ar bob dilyniant o'r genyn glyserol triphosphate dehydrogenase o rywogaethau o'r genws Colletotrichum ac organebau eraill sydd ar gael yng nghronfa ddata GenBank.
Ni ddarganfuwyd unrhyw ranbarthau DNA o organebau eraill sy'n hynod homologaidd i brimynnau a stiliwr.
Gwiriwyd sensitifrwydd y system brawf gan ddefnyddio samplau gyda chrynodiadau gwahanol o C. coccodes DNA, DNA o ddeilen datws wedi'i heintio ag anthracnose (a gasglwyd yn 2017 ym Mari El, amrywiaeth Red Scarlett), a chroen y cloron yr effeithiwyd arnynt gan smotyn du (a gasglwyd yn rhanbarth Kostroma, amrywiaeth Red Scarlett, Tabl 2). I gadarnhau presenoldeb DNA mewn cloron a dail tatws, ynyswyd straenau C. coccodes oddi wrthynt i ddiwylliannau pur.
Mae canlyniadau dadansoddiad sensitifrwydd y system brawf yn dangos y gellir ei ddefnyddio i wneud diagnosis llwyddiannus o bresenoldeb C. coccodes DNA mewn sampl os yw cyfanswm ei gynnwys yn y gymysgedd PCR yn fwy na 0.05 ng. Mae hyn yn eithaf digonol i'w ganfod, gan fod un sglerotia yn cynnwys, ar gyfartaledd, 0.131 ng, ac mae un sborau yn cynnwys tua 0.04 ng o DNA (Cullen et al., 2002). Dangosodd y system brawf a ddatblygwyd gan y grŵp Saesneg (Cullen et al., 2002) sensitifrwydd tebyg (cylch trothwy 34 ar 0.05 ng DNA a 37 ar 0.005 ng).
Roedd dadansoddiad o samplau naturiol sy'n cynnwys C. coccodau ym mhob achos yn ei gwneud hi'n bosibl datgelu ei bresenoldeb yn y sampl yn ddibynadwy (Tabl 2). Roedd y dull arfaethedig ar gyfer ynysu DNA hefyd yn berthnasol i ddadansoddi samplau planhigion naturiol.
Tabl 2. Penderfynu ar sensitifrwydd y system brawf arfaethedig ar gyfer nodi coccodau Colletotrichum ar gyfer PCR amser real
Образец | Swm DNA yn sampl *, ng | Cylch trothwy | C. canfod coccodau |
---|---|---|---|
Coccodau Mycelium Colletotrichum | 50 | 21.3 | + |
5 | 25.7 | + | |
0.5 | 29,7 | + | |
0.05 | 33.5 | + | |
0.005 | 40 | - | |
0.0005 | 42.8 | - | |
0.00005 | - | ||
Croen cloron 1 | 50 | 32 | + |
Croen cloron 2 | 50 | 30 | + |
Croen cloron 3 | 50 | 31.5 | + |
Deilen tatws | 50 | 29.5 | + |
Nodyn. * Mewn cymysgedd o gynhyrchion PCR.
Profwyd penodoldeb y system brawf ar samplau DNA a dynnwyd o 15 rhywogaeth o ffyngau. Roedd pob math o ffyngau wedi'u hynysu gan yr awduron oddi wrth ffrwythau a dail tomato, cloron tatws yr effeithiwyd arnynt ac yn iach; ynyswyd un straen oddi wrth wreiddyn gwenith (Tabl 1). Ymhlith y rhywogaethau sydd wedi'u hynysu oddi wrth wyneb y ffrwythau, mae yna hefyd rywogaethau nad ydyn nhw'n bathogenig ar gyfer tomato (er enghraifft, Phellinus ferrugineovelutinus).
Mae astudiaethau wedi dangos bod C. coccodes DNA wedi ei ganfod ar gylchred trothwy o 20–27, tra na chanfuwyd rhywogaethau ffwngaidd eraill na rhoi signal ar ôl cylch 40, y gellir eu priodoli i effaith sŵn amhenodol (Tabl 3).
Tabl 3. Profi'r system brawf ar gyfer gwahanol fathau o fadarch
Enw madarch | Cylch trothwy |
Coccodau colletotrichum 1 | 20.9 |
C. coccodau 2 | 22.6 |
C. coccodau 3 | 23 |
C. coccodau 4 | 22 |
Fusarium oxysporum. | > 40 |
F. fertigolillium | > 40 |
Rhizoctonia solani | > 40 |
Phomopsis phasoli | > 40 |
Alternaria alternata | > 40 |
A. tomatoffilia | > 40 |
Helminthosporium solani | > 40 |
Phellinus ferrugineovelutinus | > 40 |
Stemphylium vesicarium | > 40 |
Ilyonectria crassa | > 40 |
Cladosporium cladosprioides | > 40 |
C. fulvum | > 40 |
Acrodontium luzulae | > 40 |
Penicillium sp. | > 40 |
Nodyn. * Swm y DNA ym mhob sampl oedd 10 ng.
Defnyddiwyd y system brawf ddatblygedig i nodi C. coccodau mewn samplau dail tomato gyda symptomau pathogenau necrotroffig a chloron tatws hadau heb symptomau gweladwy. Ar gyfer yr astudiaeth, fe wnaethon ni gymryd cloron hadau o wahanol fathau a dyfwyd yn rhanbarthau Kostroma, Moscow, Kaluga, Nizhny Novgorod. Ystyriwyd bod presenoldeb C. coccodes DNA yn arwyddocaol yn y samplau, ac yn y dadansoddiad nad oedd y cylch trothwy yn fwy na 35. Dewiswyd y gwerth trothwy hwn ar sail y penderfyniad dibynadwy o 0.05 ng o C. coccodes DNA (cylch trothwy 33.5, Tabl 2) a'r ffaith bod cylchoedd trothwy uwch na 40, canfuwyd DNA di-nod o rai rhywogaethau eraill o ffyngau. Gyda'r dull hwn, canfuwyd presenoldeb sylweddol o DNA C. coccodes mewn 5 sampl o gloron a dyfwyd yn rhanbarthau Kostroma, Moscow, Kaluga ac mewn un ddeilen tomato o ardal Yeisk yn rhanbarth Krasnodar (Tablau 4, 5).
Tabl 4. Canfod coccodau Colletotrichum ar gloron tatws *
Rhif sampl | Amrywiaeth tatws | Lle tyfu | C. canfod coccodau | Cylch trothwy |
---|---|---|---|---|
1 | Scarlet Coch | Rhanbarth Kostroma | + | 35 |
2 | + | 35 | ||
3 | - | 38 | ||
4 | Sante | Rhanbarth Moscow | + | 34 |
5 | - | |||
6 | - | 41 | ||
7 | - | 41.8 | ||
8 | + | 30 | ||
9 | Zhukovsky yn gynnar | Rhanbarth Moscow | - | 40.5 |
10 | - | 40.6 | ||
11 | - | |||
12 | Molly | Rhanbarth Kaluga | + | 34.3 |
13 | - | 38.4 | ||
14 | Ffantasi | Rhanbarth Kaluga | - | |
15 | Gala | Rhanbarth Nizhny Novgorod. | - | |
16 | - |
Nodyn. * Swm y DNA ym mhob sampl oedd 50 ng.
Tabl 5. Canfod coccodau Colletotrichum ar ddail tomato *
Rhif sampl | Lle tyfu | C. canfod coccodau | Cylch trothwy |
---|---|---|---|
1 | Tiriogaeth Krasnodar, Ardal y Crimea | - | |
2 | - | ||
3 | - | ||
4 | - | 45 | |
5 | - | ||
6 | - | ||
7 | - | ||
8 | - | ||
9 | Tiriogaeth Krasnodar, Ardal Yeisk | - | 39.2 |
10 | - | 40.8 | |
11 | - | ||
12 | - | 41.6 | |
13 | - | 40 | |
14 | - | 41 | |
15 | - | 41.9 | |
16 | - | ||
17 | - | ||
18 | - | 40.3 | |
19 | - | ||
20 | - | ||
21 | + | 34.5 | |
22 | - | ||
23 | - |
* Swm y DNA ym mhob sampl oedd 50 ng.
Nid yw'r system brawf a grëwyd gennym yn israddol i'r system a ddatblygwyd gan ymchwilwyr o Brydain (Cullen et al., 2002) mewn sensitifrwydd a phenodoldeb ac mae'n addas ar gyfer dadansoddi samplau planhigion. Roedd ei gymhwysiad ar gyfer dadansoddi cloron hadau yn ei gwneud hi'n bosibl adnabod C. coccodau DNA mewn cloron heb arwyddion allanol o ddifrod ac i ddadansoddi haint dail yn llwyddiannus.
Hyd yn hyn, ni chynhaliwyd dadansoddiad o gloron tatws ar gyfer pla C. coccodes yn Rwsia. Dangosodd ein hastudiaeth gyntaf fod 16 allan o 5 o gloron hadau a brofwyd a dyfwyd mewn gwahanol ranbarthau o Ffederasiwn Rwsia, yn cynnwys C. coccodau. Mae hyn yn dangos bod smotyn du cloron tatws yn glefyd tatws cyffredin yn Rwsia, ac mae ei rôl wrth leihau cyfaint ac ansawdd y cnwd tatws yn cael ei danamcangyfrif.
Datgelodd dadansoddiad o ddail tomato bresenoldeb sylweddol o DNA C. coccodes mewn un ddeilen o ardal Yeisk yn Nhiriogaeth Krasnodar. Yn gynharach, wrth archwilio caeau tomato yn ne Rwsia gan ddefnyddio system brawf Prydain (Cullen et al., 2002), darganfuwyd dail sy'n cynnwys C. coccodau, ac mewn rhai caeau darganfuwyd cyfran uchel o ddail wedi'u heintio â C. coccodau (Belov et al., 2018). Yn Nhiriogaethau Krasnodar a Primorsky, Rhanbarth Moscow, gwelsom ffrwythau tomato, y gwnaethom lwyddo i ynysu diwylliannau pur C. coccodau. Mae'n bosibl bod C. coccodes yn llawer mwy eang ar domatos yn Rwsia nag a gredir bellach, ac mae ei niweidioldeb hefyd yn cael ei danamcangyfrif.
Felly, hyd yma, mae digon o wybodaeth wedi'i chasglu ar ddosbarthiad eang C. coccodau ar datws a thomatos.
Er mwyn deall yn well rôl y ffwng hwn yn natblygiad afiechydon tatws a thomato, mae angen monitro ei gyffredinrwydd yn Rwsia, astudio rôl heintiau pridd a hadau, a rôl smotyn du mewn colledion wrth ei storio. Gall defnyddio diagnosteg PCR hwyluso'r gwaith hwn yn sylweddol, a bydd defnyddio'r ddwy system brawf ar yr un pryd yn cynyddu cywirdeb y dadansoddiad yn sylweddol.
Cefnogwyd y gwaith hwn gan grant gan Sefydliad Gwyddoniaeth Rwsia Rhif 18-76-00009.
Cyhoeddwyd yr erthygl yn y cyfnodolyn "Mycology and Phytopathology" (cyfrol 54, Rhif 1, 2020).